O que pode acontecer se a amostra de urina for mantida em temperatura ambiente por mais de 2 horas?

As infecções do trato urinário (ITUs) incluem infecções restritas à bexiga (cistite), que são extremamente comuns em mulheres e podem causar dor ao urinar, bem como infecções mais graves que também envolvem os rins (pielonefrite). Se você é um clínico, provavelmente está familiarizado com o processo de solicitação de amostras de urina em pacientes com sintomas de ITU, e igualmente familiarizado com o recebimento e a ação sobre os resultados. Mas o que exatamente acontece com aquela urina, e os organismos que podem crescer a partir dela, entre o momento em que sai da bexiga e o momento em que o laudo aparece no prontuário?

Da bexiga para o coletor

Uma das variáveis ​​mais importantes no processo de cultura da urina é o método de coleta. A bexiga em si é geralmente considerada um ambiente estéril (embora, como discutiremos mais tarde, esse nem sempre seja o caso), mas a genitália externa é colonizada por bactérias comensais que podem contaminar amostras de urina e, por fim, crescer em cultura. Um aspirado suprapúbico , no qual uma agulha é inserida diretamente na bexiga através da pele bem limpa, é a maneira mais eficaz de evitar o risco de contaminação urogenital, mas esse método é relativamente invasivo e raramente usado. Para bebês, crianças pequenas e outras pessoas que não conseguem urinar diretamente em um recipiente de amostra (por exemplo, pessoas que têm uma bexiga neurogênica ), a urina pode ser coletada usando um Cateter de Foley , que é inserido através da uretra até a bexiga; este método também limita a contaminação.

Cateter de Foley.

Crianças mais velhas e adultos capazes de fazer isso podem simplesmente fornecer uma amostra de urina “anulada”: isto é, eles urinam em um copo. A abordagem de captura limpa no meio do rio é recomendada para amostras de urina anuladas, a fim de diminuir a probabilidade de contaminação. No entanto, não há como prevenir totalmente a possibilidade de contaminação, e evidências recentes sugerem que a limpeza e o uso de uma amostra no meio do fluxo podem não reduzir a contaminação . (Em contraste, o método de coleta de “urina ensacada” muito difamado às vezes usado em bebês, no qual a urina é coletada em um saco plástico colado na região perineal, pode não ser tão sujeito a contaminação clinicamente significativa como geralmente é assumido). Como veremos, a probabilidade relativa de contaminação com diferentes métodos de coleta de amostras torna-se importante na interpretação clínica dos resultados da cultura de urina.

Uma vez que uma amostra de urina tenha sido coletada, ela deve ser transportada para o laboratório. Como a quantidade bacteriana é um fator importante na avaliação da significância clínica potencial de quaisquer organismos presentes na amostra, é importante limitar o crescimento bacteriano entre o momento da coleta da amostra e o plaqueamento para cultura. Se a amostra de urina for mantida em temperatura ambiente, deve ser semeada dentro de 2 horas após a coleta. O tempo entre a coleta e o plaqueamento pode ser estendido para 24 horas se a amostra for mantida refrigerada ou transportada em recipiente com ácido bórico como conservante.

A Antevisão: Urinálise 

Geralmente leva cerca de um dia para as bactérias de uma amostra de urina crescerem até uma quantidade suficiente para que possam ser detectadas e identificadas usando técnicas de laboratório de microbiologia clínica padrão e, consequentemente, também leva pelo menos esse tempo para determinar que a bactéria não estão presentes na cultura. No entanto, informações valiosas sobre a probabilidade de uma ITU podem ser obtidas rapidamente por meio de urinálise. Os glóbulos brancos na urina, que refletem a inflamação típica da infecção, podem ser detectados e quantificados por exame de urina. A presença de ≥10 leucócitos por μL (ou> 5 por campo de grande aumento) é quase sempre observada em pessoas com ITU. A urinálise também pode testar a presença de nitritos, que são produzidos por espécies de bactérias gram-negativas que são capazes de reduzir os nitratos a nitritos; essas espécies incluem Escherichia coli, a causa mais comum de ITU. Uma tira reagente de urina no local de atendimento pode fornecer informações preliminares sobre esses testes em minutos, enquanto uma urinálise microscópica fornece resultados mais quantitativos e sensíveis. Os resultados do exame de urina também fornecem informações sobre outros parâmetros da urina, incluindo pH e a presença de glóbulos vermelhos, proteínas e outros materiais que podem ser indicações de uma variedade de doenças renais não relacionadas à infecção.

Se a urinálise de uma pessoa com sintomas de ITU confirmar uma ITU provável, um médico pode iniciar o tratamento antibacteriano empírico com base nos organismos causadores mais prováveis ​​enquanto espera pelos resultados da cultura para terapia personalizada. Por outro lado, um exame de urina normal sugere que uma ITU é menos provávelser a causa dos sintomas. Vários programas de manejo de diagnóstico avaliaram a implementação de protocolos de cultura de urina “reflexos” , nos quais uma cultura é realizada apenas se a urinálise for sugestiva de ITU. Estudos de tais abordagens indicam que podem ser eficazes na redução segura do consumo desnecessário de antibióticos. Também é importante observar que a bacteriúria assintomática , ou a presença de bactérias na urina de uma pessoa que não apresenta sintomas de ITU, não requer tratamento na maioria dos casos (mulheres grávidas são uma exceção), portanto, culturas de urina geralmente não devem ser obtidas em pessoas na ausência de sintomas de ITU.

A característica principal: cultura 

Crescimento de um organismo fermentador de lactose, como Escherichia coli, em uma biplaca de urina com ágar MacConkey (L) e ágar sangue de ovelha (R). Fonte: Thea Brennan-Krohn

Uma vez que a amostra de urina chega ao laboratório de microbiologia clínica, ela é normalmente semeada em 2 tipos de mídia: uma placa de ágar MacConkey , que inibe o crescimento de bactérias gram-positivas e também permite algumas previsões iniciais sobre a identidade de bactérias gram-negativas, e um placa de ágar sangue, que permite o crescimento de quase todas as bactérias que causam ITUs. A grande maioria das infecções do trato urinário são causadas por bactérias gram-negativa, mais vulgarmente E . coli , que cresce como colônias rosa no ágar MacConkey devido à sua capacidade de fermentar a lactose. Outros Enterobacterales, como as espécies Klebsiella e Proteus , também podem causar ITU, assim como alguns tipos de bactérias gram-positivas, incluindo espécies Enterococcus e Staphylococcus saprophyticus . Biplacas de urina, nas quais cada um dos 2 tipos de ágar preenche metade da placa, permitem um plaqueamento mais eficiente. As placas são incubadas a 35-37 ° C e examinadas às 20 horas e, se não houver crescimento neste ponto, podem ser incubadas por mais um dia e reexaminadas.

Fonte: https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Inoculation_loops-plastic_big_and_small.jpg

As culturas de urina são semeadas quantitativamente, usando uma alça de inoculação calibrada que coleta 1 ou 10 µL de urina; quando as colônias crescem no ágar, o número de unidades formadoras de colônias por mililitro (CFU / mL) pode ser calculado multiplicando por 1000 ou 100, respectivamente. Quantificar bactérias em culturas de urina é essencial, particularmente para amostras urinárias porque, como observamos acima, é comum a contaminação de amostras de urina com a flora urogenital. A identidade de quaisquer organismos que crescem, a quantidade em que crescem e o tipo de espécime são levados em consideração ao interpretar os resultados da cultura . Laboratórios de microbiologia clínica usam algoritmos detalhadospara determinar quais bactérias são relatadas ao médico e como são descritas no relatório. Os algoritmos completos para relatórios são complexos e variam até certo ponto entre os laboratórios, mas certos princípios são comuns a todos:

• Quando apenas 1 ou 2 tipos de bactérias crescem e estão presentes em grandes quantidades (ou seja, ≥ 10.000 UFC / mL), quase sempre são identificados no nível de espécie e relatados como tal.
• Quando 3 ou mais tipos de bactérias crescem e nenhum predomina (ou seja, nenhum está presente em> 100.000 UFC / mL), os resultados podem ser relatados como “flora bacteriana mista”.
• Quando as bactérias estão presentes em quantidades menores (ou seja, <10.000 UFC / mL), elas podem ser relatadas com mais detalhes se forem provenientes de amostras com maior probabilidade de ser estéreis (por exemplo, urina cateterizada) do que de amostras com maior probabilidade de estar contaminado (por exemplo, urina eliminada).
• O teste de susceptibilidade antimicrobiana não é geralmente realizado em organismos que raramente são uropatógenos (por exemplo, espécies de Streptococcus ).

O objetivo desses algoritmos é garantir que as bactérias que estão causando a doença sejam relatadas com precisão para que os pacientes possam ser tratados, evitando, ao mesmo tempo, relatos desnecessários de bactérias que provavelmente não causam uma ITU para evitar o uso excessivo de antibióticos. Claro, pode haver certas situações clínicas em que seria apropriado avaliar em mais detalhes uma cultura mista ou uma cultura com um organismo que geralmente não é um uropatógeno (por exemplo, se um paciente tem hardware do trato urinário permanente), portanto, como sempre, os médicos podem ligar para o laboratório de microbiologia para pedir mais detalhes sobre o que exatamente cresceu em uma placa particular ou para solicitar que exames adicionais sejam realizados em casos específicos.

A relativa facilidade de obtenção de uma amostra de urina e o rápido crescimento da maioria dos uropatógenos em cultura significam que a ITU costuma ser um diagnóstico aparentemente simples. No entanto, a interpretação de culturas de uma amostra que deve passar pela microbiota densa da região urogenital antes de chegar ao recipiente da amostra requer muito trabalho cuidadoso no laboratório de microbiologia clínica, onde profissionais de laboratório médico, usando sua experiência no reconhecimento de colônias em conjunto com algoritmos detalhados, deve equilibrar a necessidade de um diagnóstico com o risco de muitas informações (clinicamente irrelevantes).

AUTORA: THEA BRENNAN-KROHN

Thea Brennan-Krohn é diplomata do Conselho Americano de Microbiologia Médica do Beth Israel Deaconess Medical Center (BIDMC). Ela é assistente de Doenças Infecciosas Pediátricas no Hospital Infantil de Boston e pós-doutoranda no Beth Israel Deaconess Medical Center

FONTE:

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